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【求助】皮肤毒性实验设计


发布者:黄金赌城 日期:2021-01-28 01:29


  一般实验用白色家兔8只,雌雄各半,体重2.0-2.5kg,随机分为2组,分别为实验药品组,赋型剂组。于给药前24小时将实验兔脊柱两侧去毛,去毛面积约为75cm2。左侧脱毛区作正常皮肤刺激实验,涂抹实验药品0.15ml或等剂量的赋形剂,用一层油纸两层纱布覆盖,再用胶布固定。给药24小时后用湿纱布洗去药物,分别记录0、1、24、48及72小时给药部位出现红斑和水肿的情况,按《中药新药研究指南》中有关评分标准进行评分。72小时后,给另一块脱毛区作损伤皮肤刺激试验,给药前用针头在脱毛区皮肤上划出“#”擦伤,直径2cm,以刺伤表皮,不伤真皮,有轻度慎血为度。涂药方法同前。同样给药24小时后,用湿纱布洗去药物,分别记录0、1、24、48及72小时给药部位出现红斑和水肿的情况,按《中药新药研究指南》中有关评分标准进行评分。开始称重,第7天体重,每天动物活动,饮食情况

  家兔急性毒性试验:实验用白色家兔8只,雌雄各半,体重2.0-2.5kg,随机分为2组,为实验药品组,赋型剂组。于给药前24小时将实验兔脊柱右侧去毛,去毛面积约为75cm2(相当于家兔表面积的5﹪)。给脱毛区涂抹实验药液2.25ml(相当于临床用量单位面积的30倍)或等剂量的赋型剂,并用一层油纸两层纱布覆盖,再用无刺激性胶布固定。常规饲养,连续观察1周家兔的行为活动、皮毛光泽、饮食、体重和死亡情况。在实验家兔左侧背部去毛75cm2,给药前用针头在脱毛区皮肤上划出“#”形擦伤,直径2cm,以刺伤表皮,不伤真皮,有轻度渗血为度。随即在皮肤损伤区涂抹药膏或赋形剂,观察指标同上7。

  选取体重18~21g健康小鼠60只, 雌雄各半, 随机分为5组。分别为实验药品高剂量组(1g/ml),实验药品中剂量组(0.5g/ml),实验药品低剂量组(0.25g/ml),阳性对照(少林正骨精),赋形剂组。每天将小鼠足趾浸泡于药液中10min,连续12天.首次给药后即在颈部皮肤上滴50%的二硝基氯氮丙酮溶液2µl/只致敏,12日后在致敏小鼠的腹部皮肤上涂2.5%二硝基氯氮丙酮溶液20µl/只进行攻击,在攻击部位引起迟发性超敏反应,小鼠尾静脉注射1%伊文思蓝10ml/kg,30分钟后处死小鼠取下腹部蓝染皮肤,.剪碎,置试管中,用1:1丙酮生理盐水4ml浸泡24小时后取出离心取上清液,用721型分光光度计波长610nm测量光密度,以光密度值反应迟发性超敏反应的程度。

  动物选择:选用豚鼠30只,体重250-350g,雌雄各半。于给受试前24小时将豚鼠背部两侧毛脱掉,去毛范围每侧约3cm×3cm。观察组用实验药品,对照组用75%酒精。阳性致敏物:2,4-二硝基氯代苯(上海试剂一厂出品,批号:81-01-01),配制成1%的致敏浓度和0.1%的激发浓度(用麻油作溶剂)。实验分组:将豚鼠按体重、性别随机分成3组,每组10只(雌雄各半)。第1组给实验药品,第2组给75%酒精,第3组给阳性致敏物。致敏接触:取0实验药品.2ml涂在豚鼠左侧脱毛区,待干燥后放入动物房。第7天和第14天,以同样方法各重复次8。第2组与第3组给药方法同上。激发接触:于末次给受试物致敏后14天,将受试物0.2ml涂于豚鼠背部右侧脱毛区,6小时后用温水清洗即刻观察然后于24、48、72小时再次观察皮肤过敏反应,根据出现的红斑与水肿情况评分,计算反应值。同时计算致敏率(将动物出现红斑与水肿的例数除以受试动物总数)判断受试物的致敏强度。


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